合肥南(起点)—>巢湖东—>无为—>铜陵北—>泾县—>绩溪北—>黄山北—>婺源—>上饶—>鹰潭北—>南昌西—>宜春—>萍乡北—>长沙南—>娄底南—>新化南—>怀化南(终点)合肥南(起点)—>六安—>武
合肥南(起点)—>巢湖东—>无为—>铜陵北—>泾县—>绩溪北—>黄山北—>婺源—>上饶—>鹰潭北—>南昌西—>宜春—>萍乡北—>长沙南—>娄底南—>新化南—>怀化南(终点)
合肥南(起点)—>六安—>武汉—>咸宁北—>岳阳东—>长沙南—>韶山南—>邵阳北—>溆浦南—>怀化南(终点)
合肥(起点)—>怀宁—>太湖—>九江—>南昌—>株洲—>湘乡—>娄底—>新化—>安化—>溆浦—>怀化(终点)
K321次列车经过以下站点： 合肥（始发站）、舒城、庐江、桐城、安庆西、天柱山、太湖、宿松、九江、新余、宜春、萍乡、株洲、湘潭、娄底、新化、怀化、玉屏、镇远、凯里、贵阳、安顺、六盘水、宣威、曲靖、昆明（终点站）。 K321次列车是一列空调快速列车；
20:36从始发站合肥发车，第三天05:28到达终点站是昆明。运行时间32小时52分，全程2364公里。
